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發(fā)布時(shí)間:2020-05-28

一. 背景

洋蔥伯克霍爾德菌,拉丁名:Burkholderia cepacia (B. cepacia),原屬假單胞菌屬(Pseudomonas cepacia),是植物病原菌,因引起植物患病而得名,1971年首次有引起人類感染的報(bào)道。是囊性纖維化(CF)患者和慢性肉芽腫性病患者的條件致病菌。
 

參照PDA TR67中:“表2:與產(chǎn)品召回、非無(wú)菌制劑引起的感染及臨床感染相關(guān)的常見微生物種類”,與洋蔥伯克霍爾德菌有關(guān)的產(chǎn)品召回事件在所有召回事件中(N=144)占據(jù)首位(出現(xiàn)34 次),也占據(jù)著大眾視野。該菌已經(jīng)被美國(guó)FDA列為不可接受微生物。



二. 生長(zhǎng)特性

(1) 洋蔥伯克霍爾德菌為需氧非發(fā)酵菌,最適生長(zhǎng)溫度為30-35℃;革蘭氏染色,在顯微鏡下觀察,為革蘭氏陰性無(wú)芽孢桿菌;

(2) 氧化酶試驗(yàn):遲緩性氧化酶陽(yáng)性(紫紅色、紫色或者深藍(lán)色),反應(yīng)時(shí)間為2-10min;

(3) 過氧化氫酶試驗(yàn):洋蔥伯克霍爾德菌為遲緩產(chǎn)氣,1s后緩慢出現(xiàn)氣泡;

(4) 蔗糖氧化陽(yáng)性;枸櫞酸鹽利用試驗(yàn)陽(yáng)性;七葉苷利用陽(yáng)性;

(5) 在藥品檢驗(yàn)用非選擇性培養(yǎng)基中(TSA/TSB/SDA/SDB/NA/NB/R2A)能夠生長(zhǎng)良好,在選擇性培養(yǎng)基麥康凱液體(MACB)、麥康凱瓊脂(MACA)和紫紅膽鹽瓊脂培養(yǎng)基(VRBGA)中能夠生長(zhǎng)良好。在CA上25℃培緩慢生長(zhǎng)。EE里緩慢生長(zhǎng),RVS和XLD不支持該菌生長(zhǎng)。


三. 相關(guān)檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)


 

(1)《SN/T 4684-2016 進(jìn)出口化妝品中洋蔥伯克霍爾德菌檢驗(yàn)方法》

     該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)出口化妝品檢驗(yàn)洋蔥伯克霍爾德菌方法為:分別用含多粘菌素B的SCDLP增菌液和含慶大霉素的BCSA增菌液依次進(jìn)行增菌培養(yǎng),再分別在BCSA瓊脂(含多粘菌素B和慶大霉素)和麥康凱瓊脂(含多粘菌素B和慶大霉素)平板上進(jìn)行分離培養(yǎng);最后對(duì)疑似菌落進(jìn)行鑒定。

 

(2)《SN/T 4485-2016 進(jìn)出口口腔清潔類產(chǎn)品中洋蔥伯克霍爾德菌檢驗(yàn)方法》

該標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了進(jìn)出口口腔清潔類產(chǎn)品中檢驗(yàn)洋蔥伯克霍爾德菌方法為:通過改良LETHEEN氏肉湯增菌培養(yǎng),再劃線接種在洋蔥伯克霍爾德菌瓊脂上進(jìn)行分離培養(yǎng),最后對(duì)疑似菌進(jìn)行鑒定。

 

(3)USP42<60> MICROBIOLOGICAL EXAMINATION OF NONSTERILE PRODUCTS—TESTS FOR BURKHOLDERIA CEPACIA COMPLEX 

USP42<60>規(guī)定了使用TSB對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)培養(yǎng),在BCSA上劃線選擇性培養(yǎng)。洋蔥伯克霍爾德菌可能存在的指示特征為周圍黃色的綠棕色菌落,或者周圍粉紅色的白色菌落。挑選可疑菌進(jìn)行鑒定。


四. 關(guān)于BCSA培養(yǎng)基(USP)

     
      其中酪胨和酵母提取物提供豐富的氮源,乳糖和蔗糖提供兩種碳源,酚紅指示劑,結(jié)晶紫、萬(wàn)古霉素抑制革蘭氏陽(yáng)性菌的生長(zhǎng),慶大霉素抑制部分革蘭氏陰性菌的生長(zhǎng),多粘菌素B可抑制銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌等菌的生長(zhǎng)。

     目前,北京三藥針對(duì)洋蔥伯克霍爾德菌的檢驗(yàn)開發(fā)了兩種培養(yǎng)基,洋蔥伯克霍爾德菌選擇性瓊脂基礎(chǔ)(符合USP)和BCC培養(yǎng)基基礎(chǔ)以及對(duì)應(yīng)的配套試劑。




原文鏈接:https://mp.weixin.qq.com/s/_EL3dIQpR05UdZk_OLQx0Q

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